紫外分光光度計微量比色皿架

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（一）為何要使用微量比色皿

（1）測試樣量稀少：出于種種原因，當被檢測的樣品量一般少于1mL 時，如果仍然按照傳統的檢測方法（即將樣品放入到標準比色皿中檢測時），由于入射光束不能照射到或不能完全照射到樣品上，所以不能得到正確的檢測結果。其 原因是：我們經常使用的標準比色皿，規(guī)格為10×10mm，容積為4mL；而入射光束的光斑一般均照射在比色皿的中部（見圖－1），換句話說、如果樣品少于1.5mL時，從單色器發(fā)出的光束光斑是照射不到樣品上去的，何況區(qū)區(qū)的幾百微升的樣品呢？因此當樣品量少時只能采用微量比色皿。

（2）測試樣價格昂貴：有的標準試劑或標樣的價格很貴，如果配制的測試樣品量過大會造成不必要的經濟損失；例如當前比較熱門的DNA測試，其標準樣品每克的價錢大約1萬元人民幣。所以使用微量比色皿是勢在必行之舉。

（二）微量比色皿的種類

（1） 短光程微量比色皿：此種比色皿的特點是比色池前后壁之間的距離很窄，所以注入的液體量相應變小了，改變兩壁間的距離就可相應改變樣品體積，已達到節(jié)省樣品 或試劑的效果；此種比色皿的容積一般在100微升左右（外觀見圖－2）；此種比色皿目前市面上比較少見了，它的外形設計據說是參照東歐國家的樣例。此種比 色皿的優(yōu)點是：由于池面受光面積很大，無需進行光斑與池子間的擬合調整，安放到比色池架時很隨意，不用顧忌每次插拔比色池的位置的同一性；缺陷是清洗內壁較為困難。

（2）通用型微量池：這種微量比色皿的外形尺寸與普通標準池無二異，并且光程L仍保持10mm不變，只是在池子與光軸平行的兩側內壁上粘貼了兩塊內襯石英（或光學）玻璃已達到減少池子容積的目的；這樣、改變兩塊玻璃的厚度便可改變池子的容積，此種池子的裝入樣品量大約在0.35～1mL間；值得一提的是，通用型微量池分為兩種類型，主要區(qū)別在貼在池子兩壁上的內襯玻璃的材料；一種是普通石英（或光學玻璃），其價格較為便宜；另一種是黑石英材料，價格較為昂貴；使用黑石英材料做內襯的池子的優(yōu)點是：雜散光較少。使 用此種微量池的關鍵點是：使用前一定要檢查入射光斑是否正確地照射到光槽上，如果光斑打偏在內襯玻璃上的話，將會產生很大的噪聲；此外由于儀器在制造時， 很難保證光軸與比色池架的垂直中心完全吻合，因此光斑難免會偏離微量池的光槽；為了保證光斑完全照射到光槽中，有的儀器在使用通用微量池時往往在池子的前 面加裝一片遮光板，該遮光板的中央開一條縫隙，該縫隙與微量池的光槽的寬度一致，這樣就保證了光斑完全照射到光槽中了，這種通用型微量池的優(yōu)點是：普及性很強，基本可以配置在任何分光光度計上；同時、國產池子的價格也不算貴，普遍受到使用者的歡迎。但是該池子與短距離微量池一樣有個相同的缺點，那就是清洗時比較麻煩，使用一般的沖洗措施不易徹底洗凈池內壁的殘留物，必須采用超聲波清洗器。

（3）專用超微量比色皿：此種比色皿的容積均很小，一般進樣量小于50微升，非常適合生物樣品及微量萃取樣品；這種池子的盛液槽很小且呈水平狀，改變容積的方法也是改變池子的光程L，即前后壁的距離，此種比色皿的優(yōu)點除了進樣量少之外，還有進樣便捷和進樣量易于控制（使用普通加樣槍即可）、清洗方便等特點；

圖示：微量池架

備注：該池子在使用前，要做微量池、遮光板與光束的擬合，通過透過率或光強度的改變來監(jiān)控池架的正確位置，這個工作由圖中的調整螺釘來完成。

（三）使用微量比色皿的注意事項

（1）無論何種微量池，在使用前一定要檢查比色池與光斑的擬合狀態(tài)；這點往往是使用者易于忽略的地方，結果造成測量值的重現性和噪聲水平變差。

（2）由于微量池內腔體的狹窄，故給清洗工作帶來較使用普通池更大的麻煩，這點需要使用者給予充足的重視。