紫外分光光度法測定清火梔麥片中梔子苷含量的不確定度評定

目的：建立紫外分光光度（UV）法測定清火梔麥片中梔子苷含量的方法，并對結(jié)果進(jìn)行不確定度評定。

方法：采用UV法進(jìn)行方法學(xué)驗證并測定梔子苷含量，對測定結(jié)果進(jìn)行不確定度評定，計算合成不確定度，最終給出測量結(jié)果。

結(jié)果：清火梔麥片中梔子苷經(jīng)不確定度評定表明其含量測定結(jié)果在95%置信區(qū)間下的擴展不確定度為±1.724%（k=2）。

結(jié)論：建立的不確定度評定法能為紫外分光光度法測定中藥復(fù)方制劑有效成分的不確定度分析提供參考。

1實驗部分

1.1儀器與試劑

UV-1500PC型-紫外可見分光光度計（上海美析儀器有限公司），AUW220D型十萬分之一電子天平（JapanSHIMADZU），AB104-N型萬分之一電子天平（SwitzerlandMETTLERTOLEDO），BL6-189A型超聲儀（ShanghaiBILON）。

梔子苷對照品（批號：110749-201919，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為97.1%），購自中國食品藥品檢定研究院；清火梔麥片（市售，批號：210401、210503、210806）；甲醇（分析純，上海振興化工一廠），水為Milli-Q超純水。

1.2方法與結(jié)果

1.2.1對照品溶液的制備

精密稱取干梔子苷對照品適量，置于10mL量瓶中，加入色譜級甲醇適量，搖動使得對照品充分溶解，繼續(xù)加入色譜級甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得質(zhì)量濃度為0.8124mg/mL的對照品儲備溶液。精密量取1mL對照品儲備液置于25mL容量瓶中，用溶劑稀釋至刻度，充分搖勻，即制備成對照品溶液。

1.2.2供試品溶液的制備

取清火梔麥片供試品20片，除去包衣，研細(xì)，精密稱取粉末約0.15g，倒入50mL量瓶中，加入約40mL的甲醇溶液，超聲處理30min，放冷，再用甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜濾過，精密量取續(xù)濾液1mL置于25mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，即制備成供試品溶液。

1.2.3測定方法

取不同濃度的對照品溶液和甲醇溶液，按照UV測定方法，在238nm的波長處測定上述各溶液的吸光度（A），以A為縱坐標(biāo)，各溶液的濃度（C）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。取已制備的供試品溶液，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項下的測定方法，測定供試品中梔子苷吸光度（A），根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得出供試品中梔子苷的含量。

2不確定度評估

2.1數(shù)學(xué)模型

根據(jù)UV測定原理，確定清火梔麥片中梔子苷含量的計算公式為：

式中，W為清火梔麥片中梔子苷含量；A為供試品溶液的吸光度；V1為供試品溶解體積；V2為供試品稀釋體積；E為梔子苷的吸收系數(shù)；l為液層厚度；m為供試品稱樣量。

2.2含量測定

精密稱取適量供試品，按照方法2.1所示配制成供試品溶液，用紫外分光光度計分別測得吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線來計算清火梔麥片樣品溶液中梔子苷的含量

方法來源：[1]吳有根,陳燕軍,劉娟.紫外分光光度法測定清火梔麥片中梔子苷含量的不確定度評定[J].品牌與標(biāo)準(zhǔn)化,2024,(05):26-28+33.

儀器參數(shù)

UV-1500PC型-紫外可見分光光度計

*采用單片微機控制，128*64位液晶顯示
*寬大的液晶顯示器可顯示多組數(shù)據(jù)
*巨大的內(nèi)存空間，可存儲多組數(shù)據(jù)和曲線
*自動調(diào)0、調(diào)100%功能
*波長自動調(diào)節(jié)
*光源自動切換，濾色片自動切換
*寬大樣品池（5mm～100mm）
*具有最多十點標(biāo)樣建標(biāo)準(zhǔn)曲線測量功能
*可通過直接輸入K、B因子建立標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量測量
*可直接輸入標(biāo)樣和對應(yīng)濃度值建立標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量測量
*可斷電保存測量設(shè)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)
*配備通用并行打印接口，可打印標(biāo)題欄、測量數(shù)據(jù)、曲線參數(shù)、曲線標(biāo)準(zhǔn)樣品點和曲線
*配USB接口
*通過PC軟件控制實現(xiàn)光譜掃描等更精確和靈活的測量要求（標(biāo)配）